熒光定量PCR
熒光定量PCR(quantitative PCR, qPCR)是指在PCR體系中加入熒光基團,在擴增期間實時監測PCR反應體系中熒光信號強度的變化,并通過標準曲線對目的基因進行定量分析的PCR檢測技術。相較于傳統PCR,熒光定量PCR技術具有高靈敏性、高特異性和高精確性的特點,廣泛應用于臨床及生命科學研究各個領域,如基因的差異表達分析、SNP檢測、藥物開發臨床診斷等。
百力格作為先進的分子生物學服務公司,擁有高質量的qPCR實驗技術平臺和專業的技術團隊,可以根據客戶需求設計試驗方案,客戶僅需提供樣品和待檢測目的基因的信息,百力格提供從樣本處理、探針設計與驗證到最終檢測報告全程服務。
服務優勢
1. 探針設計:豐富的探針設計經驗可以根據客戶需求試劑探針并驗證;
2. 一站式服務:經驗豐富的技術團隊全程為您解決技術難題與服務疑問確保項目進展。
服務項目
*服務周期視樣品數量和檢測基因數量而定。
送樣要求
細胞樣本:細胞數≥106個,細胞懸液或細胞沉淀;
組織樣本:組織量≥100 mg;
DNA或RNA:體積≥10 ul,濃度≥50 ng/ul,條帶清晰且無明顯降解;
需提供檢測樣品的物種信息和檢測基因的CDS序列等。
實驗流程
交付標準
提供詳細的檢測報告,包括實驗試劑、材料儀器、軟件設置參數、實驗方法、實驗結果等;
實驗結果中包括電泳圖片、熒光擴增曲線、標準曲線、熔解曲線等原始數據與分析數據。
實例展示
案例:采用ARMS-qPCR(突變阻滯擴增系統-聚酶鏈式反應)技術檢測腫瘤輔助診斷某基因突變位點,最低檢測限可達10 ng/μL DNA樣品中含量低至1%的某基因位點突變,靈敏度≥95%,如下圖所示:
圖1為某基因基因突變頻率為20%、3%、1%的10 ng/uL DNA樣品和陰性10 ng/uL DNA樣品檢測結果的曲線圖;圖2為某基因基因突變頻率為1%的10 ng/uL DNA樣品檢測20重復的曲線圖。
圖1
圖2