甲基化檢測
DNA甲基化是表觀遺傳學的重要組成部分,真核生物中的甲基化僅發生于胞嘧啶,即在DNA甲基化轉移酶的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶轉變為5’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而抑制基因表達,參與多種疾病包括各種腫瘤的發病機理。
常用的檢測目標片段甲基化的方法是亞硫酸氫鹽測序法(Bisulfite Sequencing PCR,BSP),用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而發生甲基化的胞嘧啶不變。隨后設計BSP引物進行PCR,在擴增過程中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶,最后對PCR產物進行測序就可以判斷CpG位點是否發生甲基化稱為BSP-直接測序方法。將PCR產物克隆至載體后進行測序,可以提高測序成功率,這種方法稱為BSP-克隆測序法。百力格生物依托工業級合成平臺與專業的技術團隊可以根據客戶需求檢測分析基因組甲基化的情況。
服務優勢
精確度高,能夠檢測目的片段中每一個CpG位點的甲基化狀態。
送樣要求
細胞樣本:細胞數≥106個,細胞懸液或細胞沉淀;
組織樣本:動物組織≥100 mg,植物組織≥200 mg;
血液樣本:血液≥2 ml
FFPE樣本
DNA:體積≥20 ul,濃度≥50 ng/ul,條帶清晰且無明顯降解;
交付標準
提供完整實驗報告、電泳圖、測序結果、序列比對結果、甲基化圖以及初步分析數據等。